بررسی خواص آنتی ژنیک پروتئین نو ترکیب هیالورونیداز a استرپتوکوک پیوژنز بیان شده در باکتری اشریشیا کلی
نویسندگان
چکیده
زمینه و هدف: هیالورونیداز a از جمله پروتئینهای ترشحی استرپتوکوک پیوژن بوده که دارای قدرت آنتی ژنیک میباشد. امروزه با ردیابی آنتی بادیهای ضد این پروتئین روند عفونت ناشی از این باکتری پیگیری میشود. در این تحقیق سعی گردیده تا تولید پروتئین نوترکیب هیالورونیداز a در باکتری اشریشیا کلی انجام گیرد. مواد و روش ها: در این تحقیق تجربی با طراحی پرایمر اختصاصی و استفاده از روش pcr، ژن هیالورونیداز a از استرپتوکوک پیوژن تکثیر گردید. پس از تخلیص، ژن فوق در ناقل پلاسمیدی pet32a جهت بیان کلون گردید. سپس ساختار پلاسمیدی pet32a -hyla وارد باکتری اشریشیا کلی سویه bl21- de3-plyss شد. تولید پروتئین با القاء توسط iptg صورت گرفت. پروتئین نوترکیب با استفاده از کیت ni-nta خالص و میزان پروتئین با استفاده از روش برادفورد اندازه گیری شد. آزمایش وسترن بلات برای تایید پروتئین نوترکیب انجام شد. یافته ها: ترادف نوکلئوتیدی ژن تکثیر شده توسط روش pcr با ژن هیالورونیداز a استرپتوکوک پیوژن یکسان بود. تولید پروتئین نوترکیب هیالورونیداز a با القاء پلاسمید pet32a -hyla توسطiptg انجام گردید. تخلیص پروتئین با روش کروماتوگرافی تمایلی و با استفاده از کیت ni-nta صورت گرفت. میزان پروتئین خالص شده برابر 500 میکروگرم در میلی لیتر به دست آمد. سرم موش واجد آنتی هیالورونیداز a در روش وسترن بلات با پروتئین تولید شده واکنش داد. نتیجه گیری: تولید پروتئین نوترکیب هیالورونیداز a در میزبان اشریشیا کلی نیز امکان پذیر است. پروتئین تولید شده خاصیت آنتی ژنیک خود را به خوبی حفظ میکند.
منابع مشابه
تولید و تخلیص نواحی آنزیمی هیالورونیداز استرپتوکوک در باکتری اشریشیا کلی
زمینه و هدف: استرپتوکوکوس پیوژنز آنزیم هیالورونیداز خارج سلولی تولید می کند که با انتشار ارگانیسم در طول عفونت ارتباط مستقیم دارد. آنزیم هیالورونیداز قادر به تجزیه هیالورونیک اسید یا سیمان بین بافتی می باشد. از این آنزیم میتوان در درمان سرطان ها استفاده نمود. هدف از تحقیق حاضر کلون کردن و بیان توالی نوکلئوتیدی که در فعالیت آنزیمی هیالورونیداز نقش دارد، می باشد. مواد و روش ها: ابتدا توالی نوکلئو...
متن کاملتخلیص و بررسی ویژگی های آنتی ژنیک پروتئین پوششی ویروس موزاییک خیار بیان شده در باکتری Escherichia coli
چکیده تخلیص انواع پروتئینهای بیان شدهی ویروسی با اهداف مختلف از جمله تولید آنتیبادیهای چند همسانهای و تک همسانهای، مطالعهی ساختاری آنها، شناسایی توالی آمینو اسیدی و توالی پپتیدی با استفاده از انواع روشهای کروماتوگرافی، صورت میپذیرد که عموماً کاربرد چنین روشهایی مستلزم صرف هزینهی زیاد میباشد. در این تحقیق سعی شد پس از بیان ژن پروتئین پوششی ویروس موزاییک خیار، تخلیص و خالص سازی پروتئی...
متن کاملبیان استرپتودورناز نوترکیب در باکتری اشریشیا کلی
زمینه و هدف: در عفونت های چرکی پوستی، غلظت چرک در ارتباط با دزاکسی ریبو نوکلئوپروتئین هاست.استفاده از استرپتودورناز که یک دزاکسی ریبونوکلئاز است به همراه استرپتوکیناز به حل شدن ترشحات کمک میکند، در نتیجه ترمیم زخم در اثر خارج شدن چرک از بافت نکروز شده صورت میگیرد. هدف از این مطالعه تولید استرپتودورناز نوترکیب از سوش استرپتوکوک گروه a که از نظر تولید استرپتودورناز پر بازده است، توسط وکتور بیان...
متن کاملبیان پروتئین m۲ ویروس آنفلوانزای انسانی h۱n۱ در باکتری اشریشیا کلی
مقدمه: پروتئین m2 که یک پروتئین هوموتترامر متصل به غشا با پیوند دی سولفیدی می باشد، در میان همه ی ویروس های آنفلوانزای a به طور کامل حفاظت شده است. به همین دلیل هدف مناسبی برای توسعه ی واکسن آنفلوانزا با محافظت وسیع الطیف می باشد. در این مطالعه پروتئین m2 ویروس آنفلوانزای a در سیستم پروکاریوتی بیان شد. روش ها: ژن پروتئین m2 ویروس آنفلوانزا [a/newcaledonia/20/99 (h1n1)] پس از تکثیر به روش pcr (p...
متن کاملتولید پروتئین دوگانه EspA- Tir از باکتری اشریشیا کلی O157:H7 در گیاه توتون (Nicotiana tobbacum)
باکتری E.coli O157:H7 یک پاتوژن مهم انسان و حیوان است که در انسان موجب بروز اسهال خونریزی دهنده و سندرم اورمی همولتیک (HUS) میشود. اتصال به سلولهای میزبان اولین گام در تثبیت این باکتری است که به‌واسطه سیستم ترشحی نوع III (T3SS) و از طریق میانکش بین پروتئینهای ترشحی صورت میگیرد. در این میان EspA به‌عنوان جزء اصلی تشکیل‌دهنده سیستم ترشحی است و ارتباط تنگاتنگی با اتصال اولیه باکتری به سلول می...
متن کاملتعیین ویژگی‌های مقاومت ماکرولیدی در استرپتوکوک پیوژنز
چکیده سابقه و هدف: افزایش مقاومت آنتی‌بیوتیکی در بین سویه‌های استرپتوکوک پیوژنز، یکی از معضلات جدی در سیستم سلامت میباشد. بر این اساس و با هدف بررسی نحوه‌ی مقاومت ماکرولیدی و ویژگی‌های فنوتیپی و ژنوتیپی، 40 جدایه استرپتوکوک پیوژنز جمع‌آوری شده طی سال‌های 1392 و 1393، مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش‌ها: آنالیز میزان حساسیت سویه‌ها به آنتی‌بیوتیک‌های ماکرولیدی با استفاده از روش دیسک دیف...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراکجلد ۱۴، شماره ۲، صفحات ۷۲-۸۰
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023